本发明公开了一种负载水凝胶的聚酰亚胺生物活性材料及其制备方法和应用，属于生物材料技术领域。本发明将聚酰亚胺基材浸入强碱溶液中进行水热处理，将水凝胶包覆在处理过的聚酰亚胺基材表面，然后浸泡在生长因子溶液中，灭菌后得到负载水凝胶的聚酰亚胺生物活性材料。本发明提供的负载水凝胶的聚酰亚胺生物活性材料加工方式灵活，可制备出不同形状的基材以匹配不同的使用环境；聚乙烯醇单丁酸双网络水凝胶具有简易可控的成凝胶方式，固化速度快，制得的负载水凝胶的聚酰亚胺生物活性材料既具有贴近人体骨组织的弹性模量和强度，同时具有良好的生物相容性、成骨性能且抗菌性能优异。