本发明提供了一种香蕉果实耐冷性转录因子基因功能验证方法，包括以下步骤：(1)转录因子获取；(2)番茄遗传转化；(3)转录因子功能验证：将独立转化的MaNAC25和MaNAC28过表达品系作为实验果实，野生型的番茄果实作为对照果实，将实验果实和对照果实低温贮藏，评估比较实验果实和对照果实冷害发生的程度，验证NAC转录因子对于香蕉果实耐冷性的调控作用。本发明从香蕉果实发生冷害的内在调控入手应用转基因番茄果实进行功能验证，具有研究深度和广度，为果实优良品种选育、优化果实冷害控制技术等研究方向提供科学依据和新材料。