本发明属于烟草繁殖技术领域，公开了一种本氏烟草的快速繁殖方法及无糖生根培养方法，在田间收集子粒饱满、无病状、长势优良、发芽力高的种子作为外植体材料，先消毒后接种到初代培养基中，再放到光照环境下进行培养；待种子萌发长成幼苗后，接种到继代培养基中，生长25‑30天后，选取生长较健壮，并且生长势一致的幼苗接种到无糖生根培养基中，并放到无糖培养专用培养架上，通入二氧化碳气体，在光照环境下进行无糖生根培养20‑25天即可出苗。本发明方法提高了本氏烟草移栽的生根率和移栽成活率，加快本氏烟草的生产的化育苗，其作为科研材料的模式植物，可加科研的快试验进程。