本发明涉及微生物培养技术领域，具体公开一种铜绿假单胞菌的富集培养方法及富集装置。所述铜绿假单胞菌的富集培养方法包括以下步骤：a、取铜绿假单胞菌进行活化后，摇培，得到菌液；b、向所述菌液中加入甘油溶液，然后低温处理，得到处理菌液；c、将所述处理菌液接种至培养液中进行富集培养，在所述富集培养过程中连续加入培养液，并不断排出培养废液，直至富集培养液中的菌体浓度达到富集浓度。本发明提供铜绿假单胞菌的富集培养方法可以保证铜绿假单胞菌在富集培养过程中，培养液始终保持碳源充足，适合大批量连续扩增繁殖，且菌种在连续长期高浓度繁殖过程中可长时间维持自身的繁殖能力和活性。