本发明提供了一组针对新冠病毒omicron株S基因的特异性引物组及其应用，所述特异性引物组包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ NO：1所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ NO：2所示，所述的引物组用于新冠病毒omicron株S基因的472‑474位插入位点区RT‑RAA丰度扩增，建立了与荧光CRISPR切割效应兼容在一个反应体系中的一步法荧光CRISPR检测技术，具有较高的特异性、灵敏度及稳定性，并且操作简便快捷，为现场检测、卫生评价、临床诊断等方面提供了有力的技术支撑。