本发明涉及一种抗狂犬病病毒单克隆抗体及分泌该抗体的杂交瘤细胞株与应用，属于细胞工程与免疫学技术领域。本发明以狂犬病毒作为免疫原制备获得单克隆抗体，获得抗狂犬病毒磷蛋白单克隆抗体和抗狂犬病毒糖蛋白单克隆抗体。本发明获得的单克隆抗体与狂犬病病毒的其他蛋白以及其他抗原和病原体无交叉反应，具有很好的特异性、敏感性，在针对狂犬病毒进行包括ELISA、Western‑blot和免疫荧光在内的生物诊断方面具有良好的应用前景，并进一步拓展了抗狂犬病病毒不同抗原表位的抗体的应用价值。