本发明公开了一种2,4‑二氨基‑6‑羟基嘧啶起始物料纯度的HPLC‑UV检测方法，取2,4‑二氨基‑6‑羟基嘧啶适量，用乙腈与水按照1：1（v/v）配制成浓度约为2mg/mL的样品溶液，取1μL样品溶液注入液相色谱仪，检测有关物质含量、主成分纯度；本方法采用对强极性化合物保留较好的亲水性色谱柱，磷酸二氢钾水溶液/甲醇反相色谱体系，梯度洗脱进行分离，可以快速检测主成分2,4‑二氨基‑6‑羟基嘧啶的纯度，有效分离主成分与其起始物料盐酸胍，监控2,4‑二氨基‑6‑羟基嘧啶的反应。