本发明公开了液态渔用中草药制剂中抗生素类药物的测定方法，属于抗生素类药物测定领域，液态渔用中草药制剂中抗生素类药物的测定方法，包括以下步骤：S1：将内标混合物加入样液中涡旋0.4‑0.6min，静置4‑6min后，加入乙腈，涡旋0.8‑1.2min，S2：将混合液体积的1/4‑1/6移取出，依次加入磷酸盐缓冲溶液和三氯甲烷，涡旋0.8‑1.2min，形成磷酸盐缓冲溶液/三氯甲烷/乙腈乳浊液体系，S3：将磷酸盐缓冲溶液/三氯甲烷/乙腈乳浊液体系离心2.5‑3.5min，抽取沉淀相，以38‑42℃的氮气吹干，吹干后加入定容液，然后进行超声溶解，超声溶解后经滤膜过滤后经高效液相色谱‑串联质谱仪测定。本发明采用分散液液微萃取结合液质联用技术，同时测定液态渔用中草药制剂中的喹诺酮类、磺胺类药的残留。