本发明公开了一种脱脂固定液及其制备方法方法，包括以下成分：甲醛100～200ml/L，乙酸乙酯20～50g/L，无水乙醇100～300ml/L，甲醇100～300ml/L，甘油50～100ml/L、冰醋酸50～100ml/L和TEMED 5～10g/L。本发明脱脂固定液能够对标本快速染色且染色效果好，能够快速的溶解除去样本中的脂肪组织，同时能够促进脂肪中的纤维成分和淋巴结等组织硬化，起到促进取材速度和淋巴结检出率的作用。