本发明公开一种土壤微生物检测用的样品预处理装置，包括预处理箱、空调箱、搅拌机构、破碎机构和调温机构；空调箱为U形结构，空调箱分为进气段、连通段和出气段，调温机构包括冷凝器、吸热组件和制冷组件；冷凝器设置于预处理箱内腔，吸热组件的上下两端分别贯穿进气段和出气段，制冷组件分别与冷凝器、吸热组件相连通；进气段底面连通有集水箱，集水箱连通有泵水组件，泵水组件连通有喷头，喷头固接于预处理箱内腔侧壁并朝向搅拌机构设置；破碎机构、搅拌机构分别与预处理箱内腔侧壁固定连接，破碎机构设置于搅拌机构上方，搅拌机构设置于冷凝器的上方。本发明能够实现对板结的土壤进行粉碎加湿，对潮湿的土壤进行干燥。