本发明公开了一种同时测定5‑氯‑2‑硝基吡啶及其同分异构体的方法，包括步骤：分别用稀释剂配制5‑氯‑2‑硝基吡啶同分异构体的储备液，其中5‑氯‑2‑硝基吡啶同分异构体的种类至少为一种；配制系统适应性溶液：称取5‑氯‑2‑硝基吡啶于容器中，再分别加入5‑氯‑2‑硝基吡啶同分异构体的储备液，用稀释剂溶解后定容至刻度，混匀后得系统适用性溶液；配制供试品溶液：称取待测样品于容器中，用稀释剂溶解并定容至刻度，搅拌均匀后得供试品溶液；取稀释剂作为空白溶液，使用高效液相色谱仪对空白溶液和供试品溶液进行检测。上述技术方案中提供的同时测定5‑氯‑2‑硝基吡啶及其同分异构体的方法，能有效解决现有5‑氯‑2‑硝基吡啶及其同分异构体没有相关检测方法的问题。