本发明公开了一种新冠病毒中和抗体检测试剂盒及其制备方法，试剂盒包括免疫磁珠R1：包被血管紧张素转化酶2；酶标蛋白R2：标记了碱性磷酸酶的新型冠状病毒抗原S‑RBD蛋白；缓冲液：由氯化钠、Tween‑20、BSA、海藻糖、6‑氨基己酸、甘露醇、支链淀粉、葡聚糖200000和叠氮化钠组成。本发明试剂盒的制备方法，采用磁微粒化学发光技术，通过优化的冻干工艺，生产的新冠病毒中和抗体检测试剂盒，其有效组分为固态冻干粉，真空冻干状态下保持了其蛋白空间结构稳定，易于使用，至少可在室温下保存一年，而检测性能几乎没有改变，实现常温条件下运输和储存。