本发明涉及药用植物组织培养领域，具体公开了一种中亚苦蒿组织培养扩繁的方法，包括如下步骤：以生根培养基培养中亚苦蒿无菌带芽茎段，扩繁中亚苦蒿试管苗；所述生根培养基为向固体MS基本培养基中添加萘乙酸、蔗糖和凝固剂得到的固体培养基，所述生根培养基中，萘乙酸的含量为0.4‑0.6mg/L，蔗糖的含量为30g/L。本发明的中亚苦蒿组织培养扩繁的方法使用少量的植株材料可在短时间内快速繁殖出大批的中亚苦蒿组培苗，用于生产研究中。本发明的方法得到的所有繁育的小苗均来自于同一植株，品种与遗传性状一致，同时便于为中亚苦蒿的遗传转化相关研究提供基础。