本发明公开了一种芦笋种子培育方法：第一步，将外植体种苗移栽于相对独立的大田中，周围避免花粉类作物，在精心管理下，生长3年，得到适合采集外植体的芦笋母本；第二步，从上一步得到的外植体芦笋母本上截取外植体并消毒处理；第三步，将消毒后的外植体接种到芽诱导培养基上，送入培养室进行芽诱导培养；第四步，对幼苗进行炼苗，随后移出培养室进行移栽，得到子代母本；第五步，将两年生的子代母本春栽于大田中，通过放养蜜甜的方法连续辅助授粉两年，从第三年开始采集种子，连续采集三年，得到三代种子；第六步，将三代种子于秋季下播，按常规管理技术手段培育得到四代母本；第七步，将四代母本移栽至育种田中。