一种检测重组杆状病毒基因组滴度的方法
摘要:
本发明公开了一种检测重组杆状病毒基因组滴度的方法,包括使用新型prepGEM酶裂解重组杆状病毒,5‑15分钟裂解病毒,2‑10分钟使酶失活,杆状病毒基因组滴度用ddPCR方法检测。本发明操作简单,病毒裂解液可以直接用于ddPCR或qPCR反应。本发明从处理病毒到获得病毒基因组滴度数据,只需要6小时,完全满足用重组杆状病毒系统生产rAAV工艺中,在轮与轮放大生产之间,需要在前一轮生产末快速、准确地检测重组杆状病毒基因组滴度,以确定下一轮生产用于感染昆虫细胞的杆状病毒的精确用量,从而实现用重组杆状病毒生产rAAV级级放大的无缝衔接。
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