本发明涉及一种基于聚多巴胺修饰氧化钴猝灭磷掺杂石墨氮化碳的电化学发光的免疫传感器的制备方法。本发明通过磷酸与石墨氮化碳的前驱体三聚氰胺共聚，准确的将三嗪环结构中的部分氮原子替换成磷原子，改善了石墨氮化碳网络结构的电子环境。氧化钴具有规则的十二面体结构，表面粗糙多孔，比表面积大，生物相容性好，使用聚多巴胺修饰氧化钴，在氧化钴表面形成一层聚多巴胺薄膜以连接二抗。磷掺杂石墨氮化碳的电化学发光发射光谱和聚多巴胺修饰氧化钴的紫外吸收光谱重叠，二者之间可以发生共振能量转移，磷掺杂石墨氮化碳的电化学发光可以被聚多巴胺修饰氧化钴有效猝灭。使用磷掺杂的石墨氮化碳与神经元特异性烯醇化酶一抗结合形成一抗标记物，以聚多巴胺修饰氧化钴纳米复合材料与神经元特异性烯醇化酶二抗结合形成二抗标记物，构建了夹心猝灭型电化学免疫传感器，实现了对神经元特异性烯醇化酶的超灵敏检测，检测限为17.25 fg/mL。