本发明公开了一种负载组织因子纳米颗粒的壳聚糖和多聚磷酸钠分层喷涂式止血膜，包括以下步骤：(1)将壳聚糖在pH为4.3的乙酸溶液中搅拌16h,多聚磷酸钠在pH为8.3的Tris‑HCl中溶解；(2)将DOPC：DOPS为3：2的组织因子脂质体加入步骤(1)中的壳聚糖溶液中搅拌1h；(3)分别通过直径0.8mm与0.5mm的喷枪将壳聚糖与多聚磷酸钠溶液形成喷雾，按照壳聚糖：多聚磷酸钠体积比为10：1，分层喷涂两种材料制备层状止血膜；(4)可将步骤(3)中得到的层状止血膜置于37℃的烘箱中1h以去除表面多余水分。通过利用壳聚糖可以富集红细胞和血小板以及多聚磷酸钠可以活化凝血因子的特性，采用分层式喷涂使壳聚糖和多聚磷酸钠雾化结合，形成均匀且致密的止血膜结构，该止血膜不仅具有良好的止血效果，并且具有可塑型的特点，可以充分满足复杂的伤口环境对于止血材料形式的需求。