本发明提供的无载体医用同位素64Cu纯化方法和自动化纯化工艺，涉及医用同位素制备领域；其方法或工艺均是通过一次性分离方法实现了对64Cu、Co、64Ni的高效分离；具体的，采用AG1‑x4离子交换柱，依次用9M HCl溶液、10%乙醇与3M HCl混合液和H2O淋洗AG1‑x4离子交换柱，分别获得含有64Ni、含有放射性Co和获得含有64Cu的洗脱液，达到一次性实现三种元素高效分离的目的。并且方法或工艺中，离子交换柱需要的AG1‑x4树脂量少、成本低；纯化过程使用的含盐酸的淋洗液少，不超过10mL 9M HCl和10mL 10%乙醇~3M HCl，更为绿色环保。