本发明公开了一种亚胺还原酶突变体，以及这种亚胺还原酶突变体用于制备(S)‑尼古丁的制备方法。发明第一个目的是提供了一种亚胺还原酶突变体，解决现有技术使用酶得不到S构型的尼古丁，以及现有技术中酶活性低的问题，这种突变体可以将底物麦思明或4‑(甲胺基)‑1‑(吡啶‑3‑基)丁酮催化还原为(S)‑尼古丁。本发明第二个目的是提供这种亚胺还原酶与葡萄糖脱氢酶的共表达酶，具体是亚胺还原酶突变酶与葡萄糖脱氢酶的共表达酶，这种共表达酶应用与制备(S)‑尼古丁，降低了酶催化制备(S)‑尼古丁的成本。