本发明公开了一种具有抗炎、舒缓和修护功效的铁皮石斛发酵液及其制备方法和应用，涉及微生物发酵技术领域。本发明所述铁皮石斛发酵液的制备方法包括如下步骤：(1)将铁皮石斛粉、碳源、氮源、水混合均匀，得到发酵培养基；(2)将红曲霉种子液接种至所述发酵培养基中进行发酵，发酵温度为24～32℃，发酵时间为24～72h，得到发酵产物；(3)对所述发酵产物进行灭菌、过滤处理，得到所述具有抗炎、舒缓和修护功效的铁皮石斛发酵液。本发明通过选用红曲霉菌对铁皮石斛进行发酵，对发酵条件进行筛选，显著提升了铁皮石斛发酵液的抗炎、舒缓和修护功效，适合应用于护肤领域中。