本发明公开了一种多镜组密封准直腔、激光设备及其光路调试方法，准直腔包括两个以上准直分体；多个准直分体按序连接以形成一连通光路，首端的准直分体上设有与外部导光装置连接的入光接口以及被配置为将入光接口处入射的光束导向下一个准直分体的镜组；末端的准直分体上设有出光口以及被配置为将上一个准直分体出射的光束导向出光口的镜组；至少其中一个准直分体上设有窗片模块，窗片模块包括可相对于对应的准直分体进行插拔操作的安装座以及安装在安装座上的透光镜片，窗片模块被配置为分隔相邻的两个准直分体，且透光镜片导通两个准直分体之间的光路。本发明提供了一种方便调试光路准直的准直腔，且防尘密闭结构以使内部光学器件不易脏污受损。