本发明公开了一种体液样本病毒保存液及其制备方法和应用，涉及病毒核酸检测技术领域。其组分按终浓度计包括：氯化钠12.8‑19.2g/L、磷酸氢二钠2.28‑3.41g/L、氯化钾0.32‑0.48g/L、磷酸二氢钾0.43‑0.65g/L、液体生物防腐剂Proclin300 0.16‑0.24g/L、反式‑1,2‑环己二胺四乙酸0.58‑0.87g/L、聚乙二醇128‑192g/L。其可以保存体液中病毒核酸完整性，解决体液病毒样本采样和运输可能造成的核酸降解的问题，提高使用荧光定量PCR法进行病毒检测的灵敏度和准确性，确保下游PCR反应的有效扩增，维持待检病毒核酸浓度，提高检出率。