本发明提供一种固阴煎基准样品的指纹图谱测定方法及应用，属于药品质量控制技术领域。该方法包括基准样品的制备、供试品溶液的制备、阴性对照液及各单味药对照液的制备、混合对照品溶液的制备及将上述各溶液进行高效液相色谱检测后分析各色谱图。本发明在建立固阴煎基准样品的指纹图谱过程中，确认了24个共有特征峰，解决了指纹特征峰难以分开和杂质峰的干扰问题，保证了基准样品的化学组成稳定性和使用安全性，为后续制剂的质量控制提供了重要的参考依据，有效的控制了固阴煎基准样品的质量，使经典名方得到了更为正规的质量控制。