本发明公开一种复合光催化抗菌细菌纤维素膜材料的制备方法及应用，包括以下步骤：S1.获取光催化抗菌剂；S2.在培养基中接种并培养产细菌纤维素菌种，得到细菌纤维素水凝胶底膜；S3.采用将该催化抗菌剂均匀分散的培养基多次喷洒在静态培养出的细菌纤维素膜上，并逐步提高其浓度，两次喷洒期间进行避光培养，再利用碱液纯化，最终得到生物合成的复合光催化抗菌细菌纤维素膜。本发明简单易行、成本低、无污染；制备的薄膜结构疏松，具有良好的持水性、透气性、光驱动抗菌性和生物相容性，可应用于医用敷料、抗菌包装材料等领域。