本发明公开了一种多细胞亚群检测试剂盒，该试剂盒包括两套不同荧光基团偶联的小分子抗体、反应缓冲液及红细胞裂解液。抗体包括APC/CY7标记的CD3分子、BV605标记的CD4分子、Alexa700标记的CD8分子、Percp/Cy5.5标记的HLA‑DR分子、APC标记的CD45RA分子、FITC标记的CD19分子、BB700标记的CD197分子、APC标记的CD16分子以及CD56标记的PE分子。其中，CD3、CD19、CD56、CD16及HLA‑DR荧光抗体组合为B套装，CD3、CD4、CD8、CD45RA及CD197荧光抗体组合为T套装。本发明还提供了多细胞亚群检测试剂盒的用途。