本发明属于纳米材料和生物医学技术领域，公开了一种以微流控技术制备负载安丝菌素P‑3光响应热敏脂质体的方法和应用。首次将安丝菌素P‑3与纳米载体相结合，具体涉及一种以微流控技术制备负载安丝菌素P‑3和光敏剂的光响应热敏脂质体的方法。所述的脂质体中除了包含安丝菌素P‑3外，还包含光敏剂、磷脂、胆固醇与PEG化磷脂。通过涡流微混器，能实现稳定、连续地生产，具有高重复性。制备出的脂质体不仅提升了药物的稳定性、延长了药物在体内的循环时间，还具有光控制释放的效果。在提升抗肿瘤活性的同时，还显著减少了药物对正常组织的毒性。