本发明公开了一种HPLC法测定固本延龄丸的方法，涉及数据检测技术领域。通过建立一种TFME‑HPLC方法用于分析固本延龄丸中2种成分的含量。分别从萃取时间、解吸时间、解吸溶剂、离子强度与摇动的速度等几个方面对分析方法进行优化，确定了色谱条件与最佳的萃取参数，并对同一厂家不同批次的20批样品进行检测分析，大蜜丸中松果菊苷的平均含量为291.06μg/g；小蜜丸中松果菊苷的平均含量为489.78μg/g；大蜜丸中毛蕊花糖苷的平均含量为65.62μg/g；小蜜丸中毛蕊花糖苷的平均含量为88.65μg/g。不同批次这两种成分含量差异较大，为固本延龄丸质量标准的制定与控制提供依据。