本发明公开了一种骨膜脱细胞的方法，其中制备方法包括以下步骤：步骤1，获得骨膜组织；步骤2，将取得的组织放入10mol Tris‑盐酸中浸泡12h；步骤3，随后放入1％Triton X‑100中浸泡12h；步骤4，随后放入25u/ml DNA酶和1u/mlRNA酶中浸泡12h；步骤5，随后用PBS清洗8h，获得骨膜细胞外基质；步骤6，随后冻干，研磨成粉，灭菌备用；本发明的处理方法是将骨膜进行脱细胞、脱抗原处理，可以更好的保留原有组织活性胶原成分，并不破坏原有结构。