本发明涉及成纤维细胞外基质制备的三型胶原蛋白组合物。本发明是基于人皮肤真皮层最重要的细胞成纤维细胞调节培养液中的外基质成分，进一步进行纯化检测和分离，最终制备出三型胶原蛋白，同时复配透明质酸，形成组合物配方。针对面颈部皱纹进行除皱填充的人群使用，属于移植技术的一种成纤维细胞外基质制备的三型胶原蛋白组合物制作技术。更具体而言，通过志愿者捐献的皮肤，进行体外成纤维细胞培养，从细胞培养上清液中制备人源胶原蛋白，经检测HIV、HBV、HCV、梅毒感染标志物检测的最终结论均为无反应性，支原体阴性，细菌检测阴性。最终产品，采用SDS‑聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测，胶原提取物分子量位于45‑75KD之间，然后配比透明质酸可进一步制备化妆品、药物和医用真皮填充物等医疗器械。