本发明公开了一种杜梨硝酸盐转运蛋白基因Pbr0335，所述硝酸盐转运蛋白基因Pbr0335的全长基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了一种杜梨硝酸盐转运蛋白基因Pbr0335的特异性片段，所述基因Pbr0335的特异性片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了一种杜梨硝酸盐转运蛋白基因Pbr0335的VIGS沉默体系及其构建方法，本发明通过在特异性引物中引入BamH I酶切位点和Kpn I酶切位点，采用烟草脆裂病毒载体TRV构建杜梨Pbr0335基因沉默体系，有效降低了杜梨Pbr0335基因的表达水平，并使其能够在杜梨植株内进行系统扩散传播，为杜梨功能基因组学研究提供技术支撑。