本发明提出了噬菌体受体结合蛋白PO86在大肠杆菌O抗原血清型分型鉴定中的应用，所述噬菌体受体结合蛋白具有如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列或与其相比具有至少80％同源性的氨基酸序列。本发明的噬菌体受体结合蛋白可以特异性地结合大肠杆菌O86抗原血清型，从而可以实现快速且准确鉴定大肠杆菌O86抗原血清型，同时也可以用于富集大肠杆菌O86抗原血清型，有助于致病性大肠杆菌研究、疾病诊断和治疗及疫苗研发，对防御并控制致病性大肠杆菌传播有重要意义。