本发明属于纺织领域，涉及生物基非织造材料的制备，特别是指一种微纳交叠生物基纤维材料及其制备方法和应用。其制备方法为：（1）微纳交叠超细纤维非织造材料的准备；（2）双组分粘合层的准备；（3）叠层复合。微纳交叠生物基纤维材料相比于其它非织造材料具有表面光滑、强度高和孔径可控的优异特性，不仅屏蔽各类液体，还可以阻隔细菌、病毒，适合环氧乙烷灭菌。采用该方法制备的非织造复合材料无需添加粘合剂，对人体和环境无害，可用做医疗包装材料，建筑和土工的防水材料和服装面料等用途，制备方法具有工艺流程短、生产速度快和绿色环保的特点，适合于大规模产业化生产。