本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种检测Hg2+的生物传感器及检测方法和应用。检测Hg2+的生物传感器，包括以下组分：发卡探针，所述发卡探针含有切刻内切酶Nb.BbvCI的半识别位点序列和G‑四链体序列；引物探针，所述引物探针与所述发卡探针的一部分互补。本发明中的检测Hg2+的生物传感器能够基于引物‑模板转换的级联信号放大策略用于西洋参水浸出液中Hg2+的超灵敏检测，所述生物传感器将滚环扩增(RCA)、多重链置换扩增(MRSDA)和基于G‑四链体的turn‑on荧光开关相结合，检测灵敏度高，能有效控制背景信号，具有良好的抗干扰能力，可以用于西洋参水浸出液样品的直接检测，表现出良好的选择性，在复杂基质样品检测中具有应用前景。