本发明公开了一种鼠抗草鱼IgT单克隆抗体及其制备方法和应用，所述鼠抗草鱼IgT单克隆抗体包含重链可变区和轻链可变区，其中，重链可变区的CDR区包含如SEQ ID NO.3～5所示三个序列，轻链可变区的CDR区包含如SEQ ID NO.6～8所示三个序列；所述鼠抗草鱼IgT单克隆抗体可由保藏编号为CCTCC NO：C202288的杂交瘤细胞株IgT‑6H6G11分泌所得。本发明提供的鼠抗草鱼IgT单克隆抗体在还原条件下可以识别草鱼IgT重链，在非还原条件下，该单克隆抗体可以识别草鱼IgT的单体和多聚体形式，而且该单克隆抗体不会识别嵌合体IgMT1和IgMT2以及IgM。本发明为以草鱼抗体水平为指标的疫苗免疫效果评价方法的建立奠定了基础，有利于进一步建立快速、高效、统一的疫苗评价标准。