本发明公开了一种血清中降钙素原的定值方法，包括以下步骤：(1)血清降钙素原(PCT)的纯化富集；(2)降钙素原纯度检测；(3)酶切；(4)降钙素原定量分析。本发明方法使用LC‑MS/MS方法对血清PCT进行定值，原理是通过特征肽段的浓度推算出蛋白质的浓度，而肽段的浓度可以根据液质分析MRM模式谱图的峰面积表示，选用3条肽段计算PCT浓度，以3者平均值定值。在通常实验中，蛋白质的提取率、酶切效率、仪器的稳定性、实验误差等都会影响蛋白质的定量，而本发明方法在样品中添加等量的内标——标记肽段，可以消除以上误差，得到血清样品中PCT的浓度。