本发明公开一种猪五体的荧光探针引物、试剂盒及其应用，其中，猪五体包括猪立克次氏体、猪衣原体、猪肺炎支原体、弓形体、猪钩端螺旋体。本申请选择猪立克次氏体ORF5基因、猪衣原体glgp基因、猪肺炎支原体P95基因、弓形体B1基因、钩端螺旋体CLPS基因的保守序列设计探针引物，本发明试剂盒可以同时进行大批量的样本分析，一次检测即可鉴别样本中是否含有猪肺炎支原体、衣原体、立克次氏体、弓形体、钩端螺旋体，具有简便快捷、稳定性好、灵敏度高、特异性强的特点。