本发明公开了一种碱性植烟土壤生物修复剂，由生化有机酸、糖蜜、复合菌剂、水组成，其中复合菌剂由植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和丁酸梭菌组成。本发明还公开了该碱性植烟土壤生物修复剂的制备方法，包括：菌种制备、复合菌剂制备、制备修复剂。本发明提供的碱性植烟土壤生物修复剂利用有益微生物产酸和有机质、有机酸的优化组合，改善土壤微生态环境，提高土壤疏松度，增加土壤养分供应，提高修复效果和稳定性的同时促进作物生长，提高作物产量，具有无污染、无残留、无毒性的特点，可避免化学修复法造成的环境污染风险。