本发明属于医药精制领域，具体涉及虫草素一水合物晶体及其制备方法。从含有溶解虫草素的待纯化虫草素混合液中，通过超声耦合混合二元溶剂降温结晶、超声耦合反溶剂结晶或超声耦合反应结晶得到虫草素一水合物晶型I晶体；或者从含有溶解虫草素的待纯化虫草素混合液中，通过反溶剂结晶得到虫草素一水合物晶型II晶体。与目前报道的已知的两个无水晶型相比，本发明制备的含有结晶水的虫草素一水合物晶体因为内部氢键作用增强，有利于减缓虫草素的崩解溶出，延长虫草素片剂崩解释放时间，从而有望延长虫草素作用时间，达到延长半衰期的目的。本发明的结晶方法简单易控，得到的虫草素一水合物晶体稳定性好、收率高，产品可长期稳定储存。