本发明具体公开了一种基于遗传算法的港口作业最优路径规划仿真方法，包括：S1，设置与港口作业路径规划相关的船舶、岸桥起吊设备及集装箱卡车的作业参数值及作业参数范围；S2，对待规划的港口作业路径进行编码操作；S3，藉由遗传算法进行港口作业最优路径规划仿真；S4，输出港口作业最优路径的仿真结果。本发明又具体公开了一种基于遗传算法的港口作业最优路径规划仿真系统，包括：中央控制软件模块、参数集处理软件模块、阈值校验软件模块、仿真推演结果分析软件模块、数据存储处理软件模块和远程通信处理软件模块。本发明能快速精准地获得港口作业最优作业路径，从整体上提高港口自动化堆场的运营效率、资源配置能力、仿真准确性以及可信度。