本发明提供了一种芸薹黄化病毒RT‑LAMP‑CRISPR等温检测的核酸序列组合、试剂盒及应用，所述核酸序列组合包括用于LAMP检测的引物组、crRNA和ssDNA‑FQ探针；芸薹黄化病毒RT‑LAMP‑CRISPR等温检测检测的方法为：提取待测样品RNA，用引物组进行RT‑LAMP等温扩增反应，再使用crRNA和ssDNA‑FQ探针对扩增产物进行CRISPR等温检测，最后通过读取荧光获得检测结果。本发明针对芸薹黄化病毒的基因型特点，建立了一种基于RT‑LAMP‑CRISPR系统快速检测试剂盒及相应检测方法，该方法灵敏度高、特异性好、检出限低、且检测成本低，极大地方便了芸薹黄化病毒的田间快速诊断及病害防控。