本发明提供了一种基于多重信号放大和金属离子选择性识别现象的尿液中双miRNA的检测方法及其应用，涉及生物医学诊断技术领域，该方法包括提取尿液中的miRNA‑375和miRNA‑148a，与发卡结构HP杂交，以及与辅助链触发催化发卡组装放大反应，同时释放Hg2+和Ag+，其分别与CDs和CdTeQDs识别反应，最后基于CDs的荧光信号和CdTeQDs的荧光信号定量miRNA‑375和miRNA‑148a。该发明从分析仪器、分析步骤和成本、信号报告分子的选择、多重核酸信号放大技术和选择性识别现象的应用等方面着手，建立简单、快速、灵敏、同时均相的尿液双miRNA定量分析策略。