本发明公开一种用于幽门螺旋杆菌克拉霉素耐药性的分析试剂盒的等位特异性引物，包括针对幽门螺旋杆菌克拉霉素耐药性相关基因设计的引物，其中，幽门螺旋杆菌克拉霉素耐药性相关基因选自幽门螺旋杆菌23S，检测位点为A2143G，A2142C，A2142G和无基因突变位点，A2143G，A2142C，A2142G位点为克拉霉素耐药型，无基因突变为克拉霉素敏感型；还公开了用于幽门螺旋杆菌克拉霉素耐药性的分析试剂盒和耐药性诊断的诊断试剂盒，与分析试剂盒配套的荧光定量PCR反应体系，幽门螺旋菌克拉霉素耐药性检测方法，检测方法在非疾病诊断和治疗为目的的方法以及在药物的研发和/或筛选的应用，能告知病人是否同时有克拉霉素敏感型和耐药型幽门螺旋杆菌两种菌株双重感染，提供准确临床用药信息。