本发明公开了一种利用预处理杨木厌氧发酵产氢的方法，分为杨木废料处理、碱处理、水解、配制微生物液、微生物厌氧发酵五步；本方法提供了一种厌氧发酵制备氢气过程中更为温和的预处理方法，预处理后得到可被微生物利用的糖液进行厌氧发酵制备氢气，且在发酵过程中可实现补充物料连续性发酵；同时本方法可缓解水资源利用，在处理环节中无需水洗步骤，所得产物溶液ph值呈中性、对环境无污染，达到既节水又减少废水排放污染的问题；本发明为杨木加工剩余物的综合利用开辟了新的途径，也为厌氧发酵制备氢气提供了新的原料及技术选择。