本发明属于生物技术领域，涉及到一种重组大肠杆菌工程菌及其全细胞催化制备茶黄素的方法。该工程菌通过在载体中实现双多酚氧化酶Bmtyrc24和Bmtyrc25突变体的共表达，以此工程菌株为基础制备全细胞催化剂，并以表儿茶素没食子酸酯(ECG)和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)为底物催化合成茶黄素双没食子酸酯(TFDG)。利用本发明的大肠杆菌工程菌株所制备的全细胞催化剂应用于茶黄素TFDG的催化合成，相比现有技术，具有操作更简单、对底物催化效率、产物TFDG产率更高，多批次反应稳定性好、生产成本更低的优势。