本发明属于生物医学材料技术领域，具体涉及一种多功能防粘连生物膜及其制备方法和应用。本发明利用鸡蛋内膜作为膜基底，并通过改性、负载药物及涂覆疏水层处理制备为多功能防粘连生物膜。首先通过醋酸溶解法去除鸡蛋外壳，并对内膜进行清洗；进一步浸泡醋酸溶液及清洗，去除膜基地内侧粘附的非内膜成分备用；同时通过热处理、浸渍抗菌药物、涂覆的骨蜡层等步骤，制备成为多功能防粘连生物膜。基于鸡蛋内膜制备的防粘连生物膜，具有天然的通透性结构和结构稳定性，同时在进一步功能化过程中，还赋予其抗菌、止血及疏水性能，实现了防粘连生物膜的功能化，在组织粘连等组织再生修复中具有较大的潜力，因此具有良好的实际应用之价值。