本发明公开了一种通过检测ZNF671和ZMYND10基因甲基化诊断鼻咽癌的试剂盒。本发明公开了一种检测ZNF671和/或ZMYND10基因甲基化的引物探针组合，基于ZNF671和ZMYND10基因的特定序列设计，确定甲基化敏感性限制性内切酶的类型和酶切位点，实现在同一体系快速酶切和PCR扩增，无需进行亚硫酸盐处理，减少了DNA的损伤，转化不完全等问题。本发明构建的多重甲基化PCR反应体，实现对多靶标检测的灵敏度和准确性，适用于鼻咽癌的辅助诊断，有利于鼻咽癌的早诊早治，以无创安全的鼻咽拭子为待测样本进行检测，降低患者痛苦和检测费用。