本发明涉及分子生物学检测领域，更具体地，涉及肝癌检测领域。本发明提供了一种用于检测肝癌的组合物，包括用于检测以下区域的甲基化水平的检测试剂：OTX1基因中如SEQ ID NO:1所示的区域；MTHFD2基因中如SEQ ID NO:2所示的区域；以及FAR1基因中如SEQ ID NO:3所示的区域。同时，还提供了包括该组合物的试剂盒，所述组合物的用途。能够在临床上以高灵敏度和好特异性对肝癌进行检测；在临床上，在肝癌的早期阶段就能灵敏和特异性地检出。