本发明提供了一种高活性高产量的凹凸棒石复合酶、制备方法及其应用，具体包括以硫脲、钼源、铁源和凹凸棒石为原料，采用一步水热法即可完成制备，整体工艺简便、高效。得到的凹凸棒石复合酶具有增强的过氧化物酶和过氧化氢酶活性。以纳米酶质量计算过氧化物酶活力值为纯MoS2的10.40倍，其酶活力值达到了12.38U/mg。将活性质量换算为当量[Fe]，计算FAM中[Fe]的酶活力值达到185.33U/mg，而Fe‑MoS2中[Fe]的酶活力值为43.63U/mg。此外，在10min内分解过氧化氢产生的氧气的量为纯MoS2的2.91倍。在抗菌应用方面，对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的使用浓度分别为2ug/mL和10ug/mL时，复合酶的抗菌率仍可以达到99.3％和95.0％。在谷胱甘肽的检测方面，对其在0.65‑41.67μM浓度范围内均具有良好的线性检测范围，检测限为0.22μM。