本发明公开了一种金钗石斛总生物碱及其提取方法和在制备治疗糖尿病药物中的应用，提取方法包括金钗石斛干燥茎依次经过粉碎、过筛以及称重，得到金钗石斛粉末；按照料液比1:8～1:12用酸性乙醇浸泡金钗石斛粉末，后进行回流提取；回流提取得到的液体进行浓缩，然后用酸溶液进行溶解，得到待纯化溶液；待纯化溶液依次经过阳离子交换树脂、大孔吸附树脂纯化以及有机溶剂纯化；通过本发明公开的金钗石斛总生物碱提取方法所得金钗石斛总生物碱的纯度大于80％，收率为1.0％～1.4％，具有纯度和收率相对较高的特点。可应用于糖尿病的治疗中。