本发明涉及医学检测技术领域，提供了一种便携式检测乳腺癌标志物的比色传感芯片制备方法，包括以下步骤，制备聚苯乙烯微球圆环形阵列，取相同尺寸的羧基修饰的聚苯乙烯微球，通过液桥自组装方式获得聚苯乙烯微球圆环形阵列；制备比色传感芯片，将所述聚苯乙烯微球圆环形阵列浸入到氨基封端的抗体分散液中进行化学偶联反应，并连续清洗5次，得到比色传感芯片。本发明是基于比色法用于羧肽酶N1的定量检测，体积小，操作方便，无需荧光标记，也不需要昂贵的实验仪器和专业的技术人员，解决了现有技术中检测方法多为非便携式的设备或手工检测方法，存在灵敏度低、重复性差，导致易出现漏检和假阳性问题。